一、CDX模型構建的核心特點
| 對比項 | CDX模型 | PDX模型 |
|---|---|---|
| 細胞來源 | 腫瘤細胞系（如A549、HCT116） | 患者新鮮腫瘤組織 |
| 構建周期 | 2–6周 | 3–12個月 |
| 成本 | 低 | 高 |
| 應用場景 | 藥物篩選、機制研究 | 個體化治療、臨床轉化研究 |
二、CDX模型構建流程
1. 腫瘤細胞準備
細胞系選擇：
肺癌：A549（非小細胞肺癌）、H1975（EGFR突變）
結直腸癌：HCT116、SW480
乳腺癌：MCF-7（ER+）、MDA-MB-231（三陰性）
常用細胞系（示例）：
需定期STR鑒定，避免交叉污染。
細胞培養：
使用含10% FBS的培養基（如DMEM/RPMI-1640），傳代至對數生長期。
胰m消化后計數，調整細胞濃度（通常1×10?–5×10? cells/mL）。
2. 實驗動物選擇
免疫缺陷鼠：
裸鼠（BALB/c nude）：T細胞缺陷，適合大多數實體瘤。
NSG（NOD-scid IL2Rγ?/?）：高度免疫缺陷，適合低成瘤性細胞。
飼養環境：SPF級屏障系統，避免感染。
3. 移植方法
(1) 皮下移植（最c用）
步驟：
麻醉小鼠（異f烷或腹腔注射戊巴b妥鈉）。
背部或側腹皮膚消毒（酒精+d伏）。
皮下注射腫瘤細胞懸液（100–200 μL，含1×10?–5×10? cells）。
觀察注射部位是否形成明顯皮丘（避免漏液）。
優點：操作簡單，易于監測腫瘤體積。
(2) 原位移植（模擬腫瘤微環境）
示例：
肝癌：脾臟注射（細胞遷移至肝）。
肺癌：氣管內注射或尾靜脈注射（肺轉移模型）。
乳腺癌：乳腺脂肪墊注射（4號乳頭周圍）。
優點：更接近臨床病理特征，但手術難度較高。
(3) 尾靜脈注射（轉移模型）
注射1×10?–1×10? cells（100 μL PBS），4–6周后解剖檢測肺/肝轉移灶。
4. 模型監測與數據分析
腫瘤體積測量：
游標卡尺測量長徑（L）和短徑（W），按公式計算：
每周測量2–3次，體積達1000–1500 mm3時需終止實驗（倫理限制）。
終點指標：
腫瘤重量：解剖后稱重。
組織學分析：H&E染色、Ki-67（增殖）、TUNEL（凋亡）。
分子檢測：qPCR/WB檢測靶基因表達。
三、CDX模型的應用
1. 抗腫瘤藥物篩選
分組設計：對照組（PBS）、實驗組（化療藥/靶向藥）。
評價指標：抑瘤率（）、生存期。
2. 基因功能研究
構建穩定敲除/過表達細胞系（如CRISPR-Cas9），比較成瘤能力差異。
3. 免疫治療模型（需人源化小鼠）
共移植人PBMC或免疫檢查點抑制劑（如抗PD-1抗體）。
四、常見問題與解決方案
| 問題 | 可能原因 | 解決方案 |
|---|---|---|
| 腫瘤不成瘤 | 細胞活性低/接種量不足 | 提高細胞數（5×10? cells），改用NSG小鼠 |
| 腫瘤生長不均勻 | 注射技術不穩定 | 統一由同一操作者注射，避免氣泡 |
| 動物死亡或感染 | 手術創傷/無菌操作不當 | 術后抗生素預防（如恩n沙星） |
