腦脊髓炎動物模型構建
簡要描述：
腦脊髓炎動物模型構建：構建腦脊髓炎（Encephalomyelitis）動物模型是研究多發(fā)性硬化（MS）、感染性腦炎或自身免疫性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的重要工具
更新時間：2025-07-11
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腦脊髓炎動物模型構建
一、實驗性自身免疫性腦脊髓炎（EAE）模型
（模擬多發(fā)性硬化/MS）
1. 經(jīng)典誘導方法
| 模型類型 | 適用動物 | 抗原與佐劑 | 疾病進程 |
|---|---|---|---|
| 主動免疫EAE | C57BL/6小鼠 | - MOG??-??肽（100-200 μg） - 完q弗氏佐劑（CFA）+ 百日咳毒素（PTx，200 ng） | 慢性進展性，12-14天發(fā)病 |
| SJL/J小鼠 | - PLP???-???肽（50-100 μg） - CFA + PTx | 復發(fā)-緩解型，7-10天發(fā)病 | |
| 過繼轉移EAE | B6/SJL小鼠 | - 體外用MOG激活T細胞，靜脈回輸（5×10?個細胞） | 快速發(fā)病（3-5天），避免佐劑干擾 |
2. 關鍵步驟
免疫方案：
皮下注射抗原乳化液（脊柱兩側4點，共100 μL）。
PTx腹腔注射（0天及2天，各200 ng）。
疾病評分（0-5分標準）：
0: 無癥狀
1: 尾部無力
2: 后肢輕癱
3: 后肢完q癱瘓
4: 四肢癱瘓
5: 瀕死狀態(tài)
3. 注意事項
品系差異：C57BL/6小鼠需PTx增強血腦屏障穿透，SJL/J小鼠易復發(fā)。
病理驗證：脊髓切片LFB染色（脫髓鞘）、CD4+ T細胞浸潤（免疫組化）。
二、病毒性腦脊髓炎模型
（如西尼羅河病毒、單純皰疹病毒等）
1. 西尼羅河病毒（WNV）模型
動物：C57BL/6小鼠（6-8周齡）。
方法：
腳墊注射WNV（103-10? PFU），3-7天后出現(xiàn)神經(jīng)癥狀（震顫、癱瘓）。
檢測：
腦組織病毒載量（qPCR）、神經(jīng)元死亡（Fluoro-Jade C染色）。
2. 單純皰疹病毒（HSV-1）腦炎模型
方法：
鼻腔接種HSV-1（10? PFU），病毒沿嗅神經(jīng)入腦。
病理：
海馬和皮層炎癥（Iba1+小膠質細胞活化）、病毒抗原（HSV-gB染色）。
三、細菌/寄生蟲性腦脊髓炎模型
1. 結核性腦膜炎（TBM）模型
動物：BALB/c小鼠。
方法：
尾靜脈注射結核分枝桿菌（H37Rv株，10? CFU），4周后腦干出現(xiàn)肉芽腫。
2. 弓形蟲腦炎模型
方法：
腹腔注射剛地弓形蟲（ME49株，102-103速殖子），慢性期（4周后）形成腦包囊。
四、腦脊髓炎動物模型構建選擇與驗證要點
| 研究目標 | 推薦模型 | 檢測終點 |
|---|---|---|
| 自身免疫脫髓鞘 | MOG??-??誘導EAE | 臨床評分、脊髓LFB染色 |
| 病毒感染致神經(jīng)損傷 | WNV顱內接種 | 病毒載量、神經(jīng)元凋亡 |
| 血腦屏障破壞機制 | 過繼轉移EAE | 熒光s鈉滲透率、ZO-1蛋白表達 |
| 慢性神經(jīng)炎癥 | 弓形蟲ME49感染 | 腦包囊計數(shù)（PAS染色）、IFN-γ水平 |
五、注意事項
倫理與生物安全：
病毒模型需在BSL-2/3實驗室操作（如WNV為BSL-3）。
對照設計：
佐劑對照組（僅CFA+PTx）、空白對照組（PBS注射）。
動態(tài)監(jiān)測：
EAE模型需每日評分，病毒模型監(jiān)測體重和神經(jīng)癥狀。
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