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帶狀皰疹動(dòng)物模型構(gòu)建
更新時(shí)間：2025-06-24
訪(fǎng)問(wèn)量：162
廠(chǎng)商性質(zhì)：其他
一、帶狀皰疹動(dòng)物模型構(gòu)建實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇
1. 常用動(dòng)物及特點(diǎn)
動(dòng)物模型 | 優(yōu)點(diǎn) | 缺點(diǎn) | 適用研究 |
豚鼠（Guinea Pig） | 對(duì)VZV敏感，可潛伏感染 | 癥狀較輕，不易自發(fā)再激活 | 潛伏感染模型 |
恒河猴（Rhesus Macaque） | 接近人類(lèi)VZV感染 | 成本高、倫理限制 | 疫苗/抗病du藥評(píng)估 |
人源化小鼠（huNSG） | 可感染人VZV | 免疫系統(tǒng)不完整 | 病毒-宿主互作研究 |
大鼠（Rat） | 可誘導(dǎo)神經(jīng)痛 | 不自然感染VZV | 帶狀皰疹后神經(jīng)痛（PHN）模型 |
2. 選擇依據(jù)
研究潛伏感染 → 豚鼠 或 恒河猴
研究神經(jīng)痛 → 大鼠（非感染模型）
研究免疫逃逸 → 人源化小鼠
二、帶狀皰疹動(dòng)物模型構(gòu)建病毒株準(zhǔn)備
1. 常用VZV毒株
臨床分離株（如Oka株、Ellen株）
實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)株（如VZV-32、pOka）
重組熒光報(bào)告病毒（如VZV-ORF66-GFP）
2. 病毒擴(kuò)增與滴定
細(xì)胞培養(yǎng)：
使用 人胚胎成纖維細(xì)胞（HEF） 或 MeWo細(xì)胞 擴(kuò)增VZV。
37℃培養(yǎng)，觀(guān)察CPE（合胞體形成）。
病毒純化：超聲破碎感染細(xì)胞釋放病毒。
病毒滴度測(cè)定：
噬斑試驗(yàn)（PFU/mL）
qPCR檢測(cè)病毒DNA拷貝數(shù)
三、感染途徑與劑量
1. 感染方式
途徑 | 方法 | 適用模型 | 特點(diǎn) |
皮下接種 | 足墊或背部注射 | 豚鼠、恒河猴 | 模擬原發(fā)感染 |
鼻腔接種 | 滴鼻感染 | 人源化小鼠 | 呼吸道感染 |
神經(jīng)節(jié)直接注射 | 脊柱旁或三叉神經(jīng)節(jié)注射 | 大鼠（非VZV模型） | 模擬神經(jīng)痛 |
2. 感染劑量
豚鼠：10?–10? PFU（皮下）
恒河猴：10? PFU（靜脈/氣管）
人源化小鼠：103–10? PFU（鼻腔）
四、模型評(píng)估指標(biāo)
1. 病毒感染與復(fù)制
病毒載量檢測(cè)（qPCR檢測(cè)VZV DNA）
背根神經(jīng)節(jié)（DRG）、肺、脾組織
病毒抗原檢測(cè)（免疫組化/免疫熒光）
2. 潛伏感染與再激活
潛伏期檢測(cè)：
原位雜交檢測(cè)VZV潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄本（如ORF63）
再激活誘導(dǎo)：
免疫抑制（如環(huán)lin酰胺）
紫外線(xiàn)照射（模擬應(yīng)激）
3. 神jing病理學(xué)與疼痛行為
組織病理：
DRG炎癥、神經(jīng)元損傷（HE染色）
疼痛評(píng)估（大鼠PHN模型）：
機(jī)械痛覺(jué)過(guò)敏（Von Frey纖維）
熱痛覺(jué)過(guò)敏（Hargreaves試驗(yàn)）
4. 免疫應(yīng)答
體液免疫：ELISA檢測(cè)VZV IgG
細(xì)胞免疫：
IFN-γ ELISPOT（VZV特異性T細(xì)胞）
流式檢測(cè)CD4?/CD8? T細(xì)胞
五、注意事項(xiàng)
1. 生物安全
VZV需在 BSL-2 實(shí)驗(yàn)室操作，恒河猴實(shí)驗(yàn)需 BSL-3（若用高劑量）。
2. 動(dòng)物福利
設(shè)置 人道終點(diǎn)（如體重下降>20%、嚴(yán)重神經(jīng)癥狀）。
疼痛模型需倫理審批（如大鼠PHN實(shí)驗(yàn)）。
3. 對(duì)照設(shè)置
陰性對(duì)照：未感染/PBS組
陽(yáng)性對(duì)照：已知致病株（如Oka株）
六、常見(jiàn)問(wèn)題與優(yōu)化
1. 豚鼠模型潛伏但不自發(fā)再激活
解決方案：
免疫抑制（如潑ni松龍）
神經(jīng)損傷（坐骨神經(jīng)結(jié)扎）
2. 人源化小鼠感染效率低
優(yōu)化方案：
提高感染劑量（10? PFU）
使用 人CD34+造血干細(xì)胞重建小鼠
3. 大鼠PHN模型不涉及VZV
替代方案：
HSV-1感染模型（部分模擬VZV神經(jīng)痛）
脊神經(jīng)結(jié)扎（SNL）（純機(jī)械痛模型）
