Timm染色

Timm染色是一種生物化學(xué)中常用的染色方法，它主要用于顯示組織細(xì)胞內(nèi)重金屬的分布，特別是鋅離子的分布。這種方法在神經(jīng)科學(xué)研究中尤為重要，因?yàn)樗梢燥@示苔蘚纖維末梢的分布情況，苔蘚纖維是腦內(nèi)含鋅量高的區(qū)域。

以下是Timm染色的基本步驟：

1.標(biāo)本制備?：這通常包括開(kāi)胸經(jīng)左心室連續(xù)灌流、斷頭取腦、組織固定、蔗糖磷酸緩沖液浸泡以及低溫防護(hù)等步驟。這些步驟的目的是為了獲得適合染色的腦組織切片。

2.切片?：通過(guò)中隔海馬進(jìn)行恒溫冷凍冠狀切片，切片在磷酸緩沖液中連續(xù)收集，片厚通常為30至50微米。

3.染色?：將切片貼附于多聚賴氨酸處理過(guò)的載玻片上，晾干后進(jìn)行Timm染色。染色過(guò)程需要在避光的條件下進(jìn)行，通常使用Timm顯影劑在26℃的水浴箱或恒溫?fù)u床中染色90至150分鐘。

4.沖洗與封片?：染色后，切片用蒸餾水沖洗幾遍，可以選擇進(jìn)行尼氏染色復(fù)染，也可不復(fù)染。最后，晾干切片并用中性樹脂封膠片。

需要注意的是，Timm染色方法包括一些關(guān)鍵的試劑和步驟，這些都需要嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)指南或試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。此外，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中還需要注意一些細(xì)節(jié)問(wèn)題，如保持切片的濕潤(rùn)、避免氣泡產(chǎn)生等，以確保染色的質(zhì)量和結(jié)果的準(zhǔn)確性。

Timm染色實(shí)驗(yàn)流程：
1.切片貼附于多聚賴氨酸處理過(guò)的載玻片上，-20℃保存；
2.做的時(shí)候拿出來(lái)晾干 ，約10分鐘；
3.把Timm顯影劑倒入修復(fù)盒中，放在在26℃的水浴箱或恒溫?fù)u床里染色90-150 min,染色在避光的條件下進(jìn)行；
4.染色后，切片用蒸餾水沖洗幾遍,可以尼式染色復(fù)染，也可不復(fù)染；
5.晾干，中性樹脂封膠片。

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實(shí)驗(yàn)周期：3-4周