細胞線粒體膜電位檢測

實驗原理

細胞線粒體膜電位檢測（JC-1）是一種碳氰化合物類陽離子熒光染料，可作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-1在細胞內以聚合體和單體兩種不同的物理形式存在，分別處于不同的熒光發射峰。當JC-1 濃度低或膜電位水平低時，主要以單體形式存在，激發波長為527nm，呈綠色熒光；當JC-1濃度升高或線粒體膜電位水平較高時，形成聚合物，發出紅色的熒光，激發波長為590nm。當細胞發生凋亡時，線粒體跨膜電位被去極化，JC-1從線粒體內釋放，紅光強度減弱，以單體的形式存在于胞質內發綠色熒光，根椐這一特征就可以檢測線粒體膜電位的變化。

實驗流程

1. 細胞培養；

2. 用適當的方法誘導細胞凋亡，同時設立陰性依照組合陽性對照組，收集細胞；

3. 用PBS洗滌細胞三次，收集不多于1×106的細胞；

4. 取100 μL 10×Incubation Buffer加900μL**去離子水稀釋成1×Incubation Buffer，混勻并預熱至37℃；

5. 吸取500 μL 1×Incubation Buffer，加入1μL JC-1，渦旋混勻配成JC-1工作液；

6. 取500 μL JC-1工作液將細胞均勻懸浮，37℃，5% CO2的培養箱中孵育15~20min。

7. 室溫離心（2000rpm,5min）收集細胞，用1×Incubation Buffer洗兩次；

8. 吸取500 μL 10×Incubation Buffer重新懸浮細胞；

9. 流式細胞儀檢測，分析。

客戶提供

細胞株(凍存株或培養好的細胞)，相關藥品或MMP檢測試劑盒（可代購）

公司提供

實驗步驟、結果圖、數據結果和分析報告

實驗周期：1-2周，具體需要根據細胞生長情況及實驗內容而定。

伊萊博生物擁有豐富的研究經驗，具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米，擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米，可滿足同時飼養清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構，能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經等諸多領域。